Вычислите значения экспрессии генов из данных уровня зонда микромассивов Affymetrix с помощью процедуры Robust Multi-array Average (RMA)
ExpressionMatrix
= rmasummary(ProbeIndices
, Data
)
ExpressionMatrix
=
rmasummary(ProbeIndices
, Data
,
'Output', OutputValue
)
ProbeIndices | Вектор-столбец индексов зондов. Условием для индексов зонда является, для каждого набора зондов, пометить каждый зонд 0 на N -1, где N количество зондов в наборе зондов. Совет Используйте |
Data | Матрица значений интенсивности естественной шкалы, где каждая строка соответствует зонду совершенного соответствия (PM), и каждый столбец соответствует Affymetrix® Файл CEL. (Каждый файл CEL генерируется из отдельного чипа. Все чипы должны быть одного типа.) Совет Использование матрицы с одной точностью для Совет Можно использовать матрицу из |
OutputValue | Задает шкалу возвращенных значений экспрессии генов.
В последнем случае данные преобразуются как определено функцией |
возвращает значения экспрессии гена (набора зондов) после вычисления их из интенсивности зонда естественной шкалы в матрице ExpressionMatrix
= rmasummary(ProbeIndices
, Data
)Data
, используя вектор-столбец индексов зондов, ProbeIndices
. Обратите внимание, что каждая строка в Data
соответствует зонду идеального соответствия (PM), и каждый столбец соответствует файлу Affymetrix CEL. (Каждый файл CEL генерируется из отдельного чипа. Все чипы должны быть одного типа.) Обратите внимание, что вектор-столбец ProbeIndices
определяет зонды в каждом наборе зондов путем маркировки каждого зонда 0 на N -1, где N количество зондов в наборе зондов. Обратите внимание, что каждая строка в ExpressionMatrix
соответствует гену (набору зондов) и каждому столбцу в ExpressionMatrix
соответствует файлу Affymetrix CEL, который представляет одну микросхему.
Для данного n набора зондов с J парами зондов позвольте Yijn обозначить скорректированное по фону, журналу базы 2 преобразованное и нормированное по квантованию значение интенсивности зонда PM чип- i и j зонда. Yijn следуют линейной аддитивной модели:
Yijn = Uin + Ajn + Eijn; i = 1..., I; j = 1..., J; n = 1..., N
где:
Uin = Экспрессия генов набора зондов, n на чипе i
Ajn = эффект сродства зонда для j-го зонда в наборе зондов
Eijn = Остаточный для j-го зонда на i-м чипе
Метод RMA принимает A1 + A2 +... + AJ = 0 для всех наборов зондов. Устойчивая процедура, медианная польская процедура, оценивает Ui как меру выражения логарифмической шкалы.
Примечание
Нет столбца в ExpressionMatrix
который содержит набор зондов или информацию о генах.
вызывает ExpressionMatrix
= rmasummary (..., 'PropertyName
', PropertyValue
, ...)rmasummary
с необязательными свойствами, которые используют пары имя/значение свойства. Можно задать одно или несколько свойств в любом порядке. Каждый PropertyName
должны быть заключены в одинарные кавычки и нечувствительны к регистру. Эти имена свойства/пары значения свойств следующие:
задает шкалу возвращенных значений экспрессии генов. ExpressionMatrix
=
rmasummary(ProbeIndices
, Data
,
'Output', OutputValue
)OutputValue
могут быть:
'log'
'log2'
'log10'
'linear'
functionname
В последнем случае данные преобразуются как определено функцией functionname
. По умолчанию это 'log2'
.
Загрузите MAT-файл, включенный в программное обеспечение Bioinformatics Toolbox™, которое содержит переменные данных Affymetrix, включая pmMatrix
, матрица значений интенсивности пробы PM из нескольких файлов CEL.
load prostatecancerrawdata
Выполните настройку фона на значениях интенсивности зонда PM в матрице, pmMatrix
, с использованием rmabackadj
функция, тем самым создавая новую матрицу, BackgroundAdjustedMatrix
.
BackgroundAdjustedMatrix = rmabackadj(pmMatrix);
Нормализуйте данные в BackgroundAdjustedMatrix
, с использованием quantilenorm
функция.
NormMatrix = quantilenorm(BackgroundAdjustedMatrix);
Вычислите значения экспрессии генов из интенсивности зонда в NormMatrix
, создав новую матрицу, ExpressionMatrix
. (Используйте probeIndices
Вектор-столбец предоставляется для предоставления информации об индексах зонда.)
ExpressionMatrix = rmasummary(probeIndices, NormMatrix);
The prostatecancerrawdata.mat
файл, используемый в предыдущем примере, содержит данные Best et al., 2005.
[1] Irizarry, R.A., Hobbs, B., Collin, F., Beazer-Barclay, Y.D., Antonellis, K.J., Scherf, U., Speed, T.P. (2003). Исследования, нормализация и сводные данные данных уровня зонда олигонуклеотидного массива высокой плотности. Биостатистика. 4, 249–264.
[2] Mosteller, F., and Tukey, J. (1977). Анализ и регрессия данных (Reading, Massachusetts: Addison-Wesley Publishing Company), стр. 165-202.
[3] Best, C.J.M., Gillespie, J.W., Yi, Y., Chandramouli, G.V.R., Perlmutter, M.A., Собери, Я., Эриксон, Х.С., Георгиевич, Л., Тангрея, М.А., Duray, P.H., Gonsalez, S., Velasco, A., Linehan, W.M., Matusik, R.J., Price, D.K., Figg, W.D., Emmert-Buck, M.R., and Chuaqui, R.F. (2005). Молекулярные изменения при первичном раке предстательной железы после андрогенной абляции. Клинические исследования рака 11, 6823-6834.
affygcrma
| affyinvarsetnorm
| affyrma
| celintensityread
| gcrmabackadj
| mainvarsetnorm
| malowess
| manorm
| quantilenorm
| rmabackadj